1.0目標
制定媒體準備程序。
2.0范圍
本標準操作程序適用于微生物學部分的培養基制備。
3.0責任
微生物學家
4.0問責制
質量檢查和質量控制主管
5.0程序
5.1微生物培養基的制備和使用方法
5.1.1使用Hi-Media的脫水培養基。在使用媒體之前，請先檢查內部使用日期。
5.1.2包裝上提供了準備介質的方法。它給出了每升注射用水要懸浮的粉末量。
5.1.3稱量所需量的粉末，并添加所需量的新鮮收集的WFI。記下重量，充分混合以溶解，并在滅菌前檢查培養基的pH值。按照包裝上的說明消毒介質。高壓滅菌后；讓介質冷卻至55-60°C，在約55±5°C的溫度下存放或根據要求倒入板中。
5.1.4此存儲的媒體可以使用7天。保持記錄媒體準備的使用和格式破壞。
5.1.5肉湯培養基
5.1.5.1稱重脫水培養基的量，并根據包裝上的說明添加WFI。記下每種介質的重量。
5.1.5.2將固體溶解在WFI中，輕輕加熱（如有必要）以形成均勻的溶液，冷卻至室溫并通過使用0.1 M HCl或0.1M NaOH溶液調節所需的pH（在各個介質包裝上指定）。
5.1.5.3在適當的燒瓶或試管中分配適量的培養基。用不吸水的棉布塞好，再用鋁箔紙包好。
5.1.5.4按照包裝上的說明消毒培養基。高壓滅菌應在121°C，15磅/英寸²的條件下進行20分鐘或相應介質指定的時間。
5.1.5.5滅菌后，將培養基冷卻至室溫，使用pH指示條或pH計再次檢查pH并進行分析。
5.1.5.6將滅菌的肉湯培養基保存在25°C以下直至使用。
5.1.6瓊脂培養基
5.1.6.1按照培養基包裝上給出的方向稱量WFI中脫水培養基的量。記下每種介質的重量。
5.1.6.2將固體溶解在WFI中，輕輕加熱（如果需要）以形成均勻的溶液，冷卻至室溫，使用0.1 M HCl或0.1 M NaOH溶液調節所需的pH（在相應的介質包裝上指定）。
5.1.6.3在適當的燒瓶中分配適量的培養基。用不吸水的棉布塞好，再用鋁箔紙包好。
5.1.6.4按照包裝上的說明消毒培養基。高壓滅菌應在121°C，15磅/英寸²的條件下進行20分鐘或相應介質指定的時間。
5.1.6.5滅菌后，將介質冷卻至60ºC。
5.1.6.6將熔融介質存放在保持在55-60ºC的烤箱中，直至進一步使用。
5.1.6.7在某些情況下，例如亞硒酸鹽半胱氨酸肉湯，請勿對溶液進行高壓滅菌。制備溶液后，按照培養基包裝上給出的滅菌步驟進行。然后冷卻至室溫并使用。
5.1.6.7對于瓊脂培養基，高壓滅菌后，將其冷卻至約45-50°C，然后將培養基無菌倒入無菌培養皿中，每盤15至20 ml。使這些板固化。關閉板，將其倒置并保存在BOD培養箱中（低于25°C）。
5.1.6.8一天中準備的所有介質應分配相應的批號。這些批號 應在媒體準備，實用程序和銷毀記錄中輸入。
5.2分配批號
在一個高壓滅菌循環中準備的所有介質應具有各自的批號，并且應將這些批號輸入到介質準備和記錄中。應按以下方式分配高壓滅菌介質的批號：
XXX / ZZZZZ
其中XXX：每年高壓
滅菌器裝載號，從001開始。
ZZZZZ：制造商提供的介質批號。
在2小時內對微生物培養基進行滅菌。從他們的準備。
5.3微生物培養基的儲存
準備的培養基：
肉湯：存放于25°C以下。
熔融瓊脂培養基：在55-60°C之間儲存
制備的板：在25°C以下在BOD中儲存
5.4媒體測試：
5.4.1 pH：在一次運行中，從各種營養培養基中制備一次，高壓滅菌后取樣，然后冷卻至室溫。用電極測量固體介質（固化前）和液體介質的pH值。記錄結果。如果測得的pH值不符合要求，則為同一批次的另外兩個容器確定pH值。如果兩次重復的結果均在限值范圍內，則可以將中等批次的樣品用于測試。如果結果不符合要求，則不得使用該批次并將其丟棄。
5.4.2預孵育
將培養基預孵育48小時。孵育后，對介質進行物理檢查以檢查是否存在任何污染（宏觀證據的增長），如果存在污染，請按照SOP丟棄所有介質以棄置介質。
5.4.3促進生長的性質
根據SOP，使用指示生物測試選擇性和非選擇性培養基的促生長特性。
6.0縮寫
SOP：標準操作程序
QA：質量保證
QC：質量控制
BOD：生物需氧量
M：摩爾比
WFI：注射用水
