二、將需滅菌的培育基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內，關閉鍋蓋，查看排氣閥、安全閥狀況，
三、翻開電源，查看參數設置是否正確，然后按下“work”鍵，滅菌鍋開端作業；主動派涼氣，到105℃時，底部排氣閥門主動關閉，然后壓力開端上升；
四、壓力升** 0.15MPa（121℃）時，滅菌鍋再次主動放氣，然后開端記時，一般培育基滅菌20min，蒸餾水滅菌30min；
五、到達規則的滅菌時刻后，關閉電源，翻開放氣閥緩慢放氣；當壓力指針降** 0.00MPa時，放氣閥無蒸汽掃除時，方可敞開鍋蓋。 六、留意事項
1、汽未放盡前，不得敞開高壓鍋；
2、如果滅菌后的培育基在鍋內不及時拿出，需在蒸汽放盡后將鍋蓋翻開，切忌將培育基關閉在鍋內過夜。
3、壓力表指針在0.05MPa以上時，不能過快放汽，以避免壓力急速下降，液體滾沸，從培育容器中溢出。
4、操作過程，請留意安全，當心燙傷。
高溫滅菌鍋的運用方法
1．shou先將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內參加適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。
2．放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。留意不要裝得太擠，避免防礙蒸汽流轉而影響滅菌作用。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，避免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。
3．加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內。再以兩兩對稱的方法一起旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊共同，勿使漏氣。
4．用電爐或煤氣加熱，并一起翻開排氣閥，使水歡騰以掃除鍋內的冷空氣。待冷空氣完全排盡后，關上排氣閥，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐步上升。當鍋內壓力升到所需壓力時，操控熱源，保持壓力**所需時刻。本試驗用 1．05kg/cm2，121．3℃，20分鐘滅菌。 5．滅菌所需時刻到后，堵截電源或關閉煤氣，讓滅菌鍋內溫度天然下降，當壓力表的壓力降**0時，翻開排氣閥，旋松螺栓，翻開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時，翻開排氣閥，就會因鍋內壓力俄然下降，使容器內的培育基因為內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，形成棉塞感染培育基而發生污染。
6．將取出的滅菌培育基放入 37℃溫箱培育24小時，經查看若無雜菌成長，即可待用。
不過有幾點要留意的： 1.鍋內有必要要有足夠的水。 2.鍋的氣密性一定要很好。
3.運用完后一定要放到合適溫度才能夠翻開。
