上海申安手提式滅菌鍋在米曲霉固態發酵豆粕制備大豆肽的研究中的應用

豆粕：山東萬得福集團生產。

1.1.2 培養基

斜面培養基：米曲霉A-9005 查氏培養基[3]；液體活化培養基：米曲霉A-9005 查氏培養基[3];

發酵培養基及其發酵：水質量分數65%，豆粕與麩皮按設計比例配制，pH 值5.4~7.0， 取28 g 分裝于250 mL 三角瓶中，121 ℃，20 min 滅菌， 待用。

按10%冷卻接種，于不同溫度下進行發酵。

1.1.3 試劑

濃硫酸，雙氧水，五水硫酸銅，硫酸鉀，硒粉，硼酸，溴甲酚綠，甲基紅，鹽酸，氫氧化鈉，以上試劑均為分析純。

1.1.4 儀器設備

上海天平儀器廠FA2004 分析天平； 東聯電子HZQ-Q 振蕩器；北京醫用LG10-2.4 高速離心機；蘇州凈化SW-CJ-2G 型雙人凈化工作臺； 上海申安DSX-280AI 型不銹鋼手提式滅菌鍋；FOSS 分析公司全自動凱氏定氮儀； 上海精宏MJPS-150 型霉菌培養箱。

1.2 實驗方法

1.2.1 工藝流程

原料（主要為豆粕）→固態發酵→三氯乙酸提

取→大豆肽提取液。

將接菌后的發酵培養基放入相對濕度90%霉菌培養箱，在不同溫度下培養。

取一定量豆粕，按不同比例加入麩皮，調pH 值**5.4～7.0，發酵料坯含水率調節**65％。經滅菌、冷卻，用米曲霉A-9005 接種，選擇不同的發酵溫度，

發酵過程和結束后測定發酵豆粕中酸溶蛋白含量。

1.2.2 提取及計算方法

稱取5 g 樣品（精確**0.0001 g）， 加入5 mL10%三氯乙酸溶液，混合均勻，再加入10 mL 5%三氯乙酸溶液， 靜置沉降5 min 后轉到離心管中，在4000 r/min 下離心10 min， 取上清液并轉到25 mL比色管中定容[4]。